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核酸檢測試劑原材料有哪些呢,趕緊來看看吧
時間:2020-12-17 點擊次數:356
   核酸檢測試劑原材料有哪些呢,趕緊來看看吧
  核酸檢測試劑是基於核酸擴增檢測技術的體外診斷試劑,包括等溫擴增、PCR,qPCR等。現在有些實驗室自己合成引物探針,生產qPCR診斷試劑,也有些試劑生產企業在問如何保證試劑生產過程的質量控製。
  檢測試劑的生產質控與診斷試劑的評價既有相同點,因為都是基於相同的評價指標;又有不同點,生產過程會關注原料、半成品、成品,診斷試劑評價隻針對成品。
  核酸檢測試劑原材料有如下這些:
  1、dNTP
  脫氧三磷酸核苷,核酸的組成成分,包括:dATP、dUTP、dGTP、dCTP和dTTP。應為HPLC純、PCR級,無DNase和RNase汙染。-20℃保存。
  2、引物
  由一定數量的核苷酸構成的特定序列,通常采用DNA合成儀人工合成,合成後經聚丙烯酰胺凝膠電泳或其他適宜方法純化。凍幹粉,1800D以上。序列正確。純度應達到電泳級(PAGE)或HPLC級,不含雜帶。應提供合成機構出具的合成產物的質檢證明,如PAGE電泳結果或HPLC分析圖譜。應作HPLC分析和紫外光吸收分析。以紫外分光光度計測定OD260nm/OD280nm的比值在1、6~2、0之間,可視為合格引物。-20℃保存。
  3、探針
  是指特定的帶有示蹤物(標記物)的已知核酸片段(寡聚核苷酸片段),能與互補核酸序列退火雜交,用於特定核酸序列的探測。通常采用DNA合成儀人工合成,合成後經聚丙烯酰胺凝膠電泳或其他適宜方法純化,在5-端標記熒光素報告基團或其他發光標記物,在3-端標記熒光素淬滅基團,並經HPLC或其他適宜方法純化。
  4、Taq DNA聚合酶
  具有DNA聚合酶活性,無核酸外切酶活性及核酸內切酶活性;具熱穩定性,94℃保溫1小時後仍保持50%活性。-20℃保存。
  5、UNG(尿嘧啶糖基化酶)
  具有尿嘧啶糖基化酶活性,無核酸外切酶及核酸內切酶活性,IU UNG在 37℃處理3分鍾後,103拷貝以下含U模版應完全降解,不能產生擴增產物。-20℃保存。
  6、RT-PCR酶(反轉錄擴增酶)
  具逆轉錄酶活性和DNA聚合酶活性,無核酸外切酶及核酸內切酶活性;具熱穩定性,94℃1小時後仍保持50%活性,-20℃保存。
  好了,以上便是關於核酸檢測試劑的相關內容介紹了。

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